Tenký řez plicní tkáně obarvený hematoxylinem a eosinem. Tento jedinec trpí rozedmou plic.
Histologie je studium tkáně rozřezané na tenký plátek pomocí mikrotomu. Lze ji popsat jako mikroskopickou anatomii. Histologie je základním nástrojem biologie.
Histopatologie, mikroskopické studium nemocné tkáně, je důležitým nástrojem anatomické patologie, protože přesná diagnóza nádorových a jiných onemocnění obvykle vyžaduje histopatologické vyšetření vzorků.
Vystudovanými vědci, kteří provádějí přípravu histologických řezů, jsou histotechnici, histologičtí technici (HT), histologičtí technologové (HTL) nebo lékařští vědci. Jejich obor se nazývá histotechnologie.
Histologické vyšetření tkání začíná chirurgickým zákrokem, biopsií nebo pitvou.
Tkáně jsou fixovány ve fixativu, což je proces, který stabilizuje tkáně, aby se zabránilo rozkladu. Nejčastějším fixativem je neutrální pufrovaný formalin (10% formaldehyd v fosfátovém pufrovaném fyziologickém roztoku (PBS)).
Nejběžnější technikou je zalévání voskem. Vzorky se ponoří do několika koupelí postupně koncentrovanějšího etanolu, aby se tkáň dehydratovala, následuje čistící prostředek, jako je xylen nebo histoclear, a nakonec horký roztavený parafín (impregnace). Během tohoto 12 až 16hodinového procesu nahradí parafín vodu: měkké, vlhké tkáně se změní na tvrdý parafínový blok, který se pak vloží do formy obsahující více roztaveného vosku (zalitého) a nechá se vychladnout a ztvrdnout.
Tkáň se pak pomocí mikrotomu rozdělí na velmi tenké (2 – 8 mikrometrů) řezy. Tyto řezy, obvykle tenčí než průměrná buňka, se pak umístí na sklíčko k barvení.
Chcete-li vidět tkáň pod mikroskopem, jsou řezy obarveny jedním nebo více pigmenty. To se provádí tak, aby se vytvořil kontrast k vyšetřované tkáni, protože bez obarvení je velmi obtížné vidět rozdíly v morfologii buněk. Hematoxylin a eosin (zkráceně H&E) jsou nejčastěji používaná barviva v histologii a histopatologii. Hematoxylin barví jádra modře, eosin barví cytoplazmu růžově. Existují stovky různých dalších technik, které byly použity k selektivnímu barvení buněk a buněčných složek. Mezi další sloučeniny používané k barvení tkáňových řezů patří safranin, olejově červené o, kongově červené, rychle zelené FCF, stříbrné soli a četná přírodní a umělá barviva, která obvykle pocházela z vývojových barviv pro textilní průmysl.
Histochemie odkazuje na vědu o použití chemických reakcí mezi laboratorními chemikáliemi a složkami v tkáni. Běžně prováděnou histochemickou technikou je Perlsova pruská modrá reakce, používaná k prokázání ložisek železa u nemocí, jako je hemochromatóza.
V poslední době se protilátky používají ke specifické vizualizaci proteinů, sacharidů a lipidů: tomu se říká imunohistochemie. Tato technika výrazně zvýšila schopnost identifikovat kategorie buněk pod mikroskopem. Další pokročilé techniky zahrnují in situ hybridizaci k identifikaci specifických molekul DNA nebo RNA a konfokální mikroskopii. Digitální kamery se stále více používají k zachycení histologických a histopatologických snímků.
K alternativním technikám patří kryosekce. Tkáň se zmrazí a rozřeže pomocí kryostatu. Jsou obarveny simulačními způsoby jako voskové řezy. Plastové zalití se běžně používá při přípravě materiálu pro elektronovou mikroskopii. Tkáně se zalijí epoxidovou pryskyřicí. Velmi tenké řezy (méně než 0,1 mikrometru) se rozřežou pomocí diamantových nebo skleněných nožů. Řezy se obarví barvami s elektronovou hustotou (uran a olovo), aby byly vidět elektronovým mikroskopem.
V 19. století byla histologie samostatnou akademickou disciplínou. Nobelovu cenu za fyziologii nebo lékařství za rok 1906 získali dva histologové, Camillo Golgi a Santiago Ramón y Cajal. Měli soubojové interpretace nervové struktury mozku založené na rozdílných interpretacích stejných obrazů.
Histologická klasifikace zvířecích tkání
Všimněte si, že tkáně z rostlin, hub a mikroorganismů mohou být také vyšetřeny histologicky. Jejich struktura je velmi odlišná od tkání živočišných.
Histologický artefakt je struktura nebo rys, který chybí v živých tkáních, ale je zaveden během přípravy nebo barvení. Odstraňování problémů a minimalizace artefaktů je hlavní součástí disciplíny histochemie.
2. Stedman’s Medical Dictionaries (2005). Stedman’s Online Medical Dictionary. Retrieved 2005-01-26.