Deoxyribonukleáza

Deoxyribonukleáza (zkráceně DNáza) je jakýkoli enzym, který katalyzuje hydrolytické štěpení vazeb fosfodiesteru v DNA páteři. Deoxyribonukleázy jsou tedy jedním typem nukleázy. Je známa široká škála deoxyribonukleáz, které se liší svou substrátovou specificitou, chemickými mechanismy a biologickými funkcemi.

Některé DNázy štěpí pouze zbytky na koncích molekul DNA (exodeoxyribonukleázy, typ exonukleázy). Jiné štěpí kdekoliv v řetězci (endodeoxyribonukleázy, podmnožina endonukleáz).

Některé jsou poměrně nevybíravé, pokud jde o sekvenci DNA, při které řezají, zatímco jiné, včetně restrikčních enzymů, jsou velmi sekvenčně specifické.

Některé štěpí pouze dvouvláknovou DNA, jiné jsou specifické pro jednovláknové molekuly a další jsou aktivní vůči oběma.

Druhy deoxyribonukleáz

Dva hlavní typy DNázy, které se vyskytují u metazoanů, jsou známy jako deoxyribonukleáza I a deoxyribonukleáza II.

Mezi další typy DNázy patří mikrokoková nukleáza.

Obsah deoxyribonukleáz

DNA absorbuje UV světlo s vlnovou délkou maximální absorbance kolem 260 nm. Tato absorpce je způsobena pí elektrony v aromatických bázích DNA. V dsDNA, nebo dokonce v oblastech RNA, kde dochází k dvouvláknové struktuře, jsou báze naskládány paralelně k sobě a překrytí bazálních molekulových orbitalů vede ke snížení absorbance UV světla. Tento jev se nazývá hyperchromický efekt. Když DNAse uvolní nukleotidy z dsDNA, báze již nejsou naskládány jako v dsDNA, takže orbitální překrytí je minimalizováno a UV absorbance se zvyšuje. Toto zvýšení absorbance je základem Kunitzovy jednotky aktivity DNAse. Jedna Kunitzova jednotka je definována jako množství enzymu, které způsobí zvýšení absorbance při 260 nm o 0,001 na ml při působení na vysoce polymerovanou DNA při 25 C a pH 5,0 za specifikovaných podmínek. Standardní enzymatický preparát by měl probíhat souběžně s neznámým, protože standardizace DNA preparátů a jejich stupeň polymerizace v roztoku není možný.