Substrát je v biochemii molekula, na kterou enzym působí. Enzymy katalyzují chemické reakce zahrnující substrát (substráty). Substrát se váže na aktivní místo enzymu a vzniká enzymaticko-substrátový komplex. Substrát se rozloží na produkt a uvolní se z aktivního místa. Aktivní místo nyní může přijmout jinou substrátovou molekulu. Příkladem substrátu by bylo mléko a přidaným enzymem by byl renin, který způsobuje usazování mléka. Dalším příkladem by byla reakce katalázy při rozkladu peroxidu vodíku, který je:
Obecná rovnice je následující:
kde E = enzym, S = substrát (substráty), P = produkt (produkty)
Všimněte si, že pouze střední krok je nevratný.
Reakce sleduje Michaelis-Mentenovu kinetiku.